МОДУЛЬ 4.
Методология исследования чувствительности к антибиотикам
Как правильно выявить устойчивость к антибиотикам. Наглядные лабораторные эксперименты и проведение собственных исследований.
ЛЕКЦИЯ 4.5.
Подготовка бактерий к тесту на определение чувствительности к антибактериальным препаратам (диско-диффузионным методом)
Предлагаем разобрать этапы осуществления методики постановки теста определения чувствительности к антибиотикам с помощью диско-диффузионного метода, начиная от приготовления бактериальной суспензии и заканчивая нанесением дисков с антибиотиками.
Презентация
Рекомендуемые материалы
1
Учебный фильм «Определение чувствительности к антибиотикам. Диско-диффузионный метод EUCAST. Приготовление инокулюма» (приготовление бактериальной суспензии)/Электронный ресурс/Режим доступа https://www.youtube.com/watch?v=CG-kPBp_CW4&list=PLQU_kWRWBld7s-iX2FCVVHJ3dj6WjrKNB&index=2

Серия следующих коротких видео по постановке и учету результатов диско-диффузионного метода определения антибиотикорезистентности сняты в сотрудничестве со Всемирной организацией здравоохранения и EUCAST (дословный перевод - Европейского комитета по определению чувствительности микроорганизмов).
На 1 мин 43 сек начинают говорить про стрептококки, шоколадный агар и 1 ед мутности по Макфарланду. Дело в том – что на этом видео показано как работать с разнообразными микроорганизмами, некоторые из них имеют особенные питательные потребности и поэтому стандарт методики может немного отличаться. В нашем случае мы работаем с кишечной палочкой – неприхотливым микроорганизмом, поэтому мы используем простые среды и концентрацию бактерий – 0,5 по Макфарланду.
2
Учебный фильм «Определение чувствительности к антибиотикам. Диско-диффузионный метод EUCAST. Инокуляция чашек с агаром» (нанесение бактериальной суспензии на чашки Петри)/Электронный ресурс/Режим доступа https://www.youtube.com/watch?v=di8e0RjW0jU&list=PLQU_kWRWBld7s-iX2FCVVHJ3dj6WjrKNB&index=2

Видео начинается с 2 типов питательных сред для разных типов микроорганизмов – неприхотливых и с особенными питательными потребностями (или привередливых). Как вы видите, если исследуемая вами бактерия относится к привередливым типам микроорганизмов, то питательная среда будет содержать дополнительные добавки. На 23 сек в таблице перечислены не привередливые микроорганизмы – наша кишечная палочка относится к семейству Enterobacteriaceae. Далее показана техника нанесения бактериальной суспензии с помощью автоматического устройства и вручную.
3
Учебный фильм «Определение чувствительности к антибиотикам. Диско-диффузионный метод EUCAST. Нанесение дисков и инкубация» (нанесение дисков с антибиотиками)/Электронный ресурс/Режим доступа https://www.youtube.com/watch?v=5oSvKEYq81A&list=PLQU_kWRWBld7s-iX2FCVVHJ3dj6WjrKNB&index=3

На видео показано как наносить диски вручную и с помощью специального диспенсера (используют при большом количестве исследований). Также показано разное время инкубации для разного типа микроорганизмов (соответственно и для разных питательных сред), а также разные условия – в одних случах инкубация в обычных условиях, в других – в условиях с повышенным содержанием СО2.